Государственная фармакопея Республики Беларусь -
Скачать (прямая ссылка):
Фильтрат и промывочный растворитель объединяют и отгоняют, используя ротационный испаритель, при температуре не выше 40°С, до практически полного испарения растворителя. К остатку добавляют несколько миллилитров толуола Р и нагревают снова до тех пор, пока весь ацетон не будет отогнан. Остаток растворяют в 8 мл толуола Р. Фильтруют через мембранный фильтр (45 мкм), ополаскивают колбу и фильтр толуолом Р и доводят объём фильтрата до 10,0 мл тем же растворителем (раствор А).
2. ОЧИСТКА
2.1. Хлорорганические, фосфорорганические, пиретроидные инсектициды.
Испытание осуществляется с помощью эксклюзионной хроматографии (2.2.30).
При хроматографировании могут использоваться:
- колонка из нержавеющей стали длиной 0,30 м и внутренним диаметром 7,8 мм, наполненная сополимером стирол-дивинилбензолом Р (5 мкм);
- толуол Р как подвижная фаза при скорости протока 1 мл/мин.
Подготовка колонки. Хроматографируют 100 мкл раствора, содержащего 0,5 г/л метилового красного Р и 0,5 г/л орацетового синего 2Р Р в толуоле Р. Изменение цвета элюата с оранжевого на синий должно происходить при объёме элюирования 10,3 мл. Если необходимо откалибровать колонку, используют растворы в толуоле Р инсектицида с наименьшей молекулярной массой (например, дихлофос) и с наибольшей молекулярной массой (например, дельтаметрин). Определяют, какая фракция элюата содержит оба инсектицида.
Очистка испытуемого раствора. Хроматографируют подходящий объём раствора А (от 100 мкл до 500 мкл). Собирают фракцию, как описано выше (фракция, которая содержит оба инсектицида) (раствор В). Фосфорорганические инсектициды обычно элюируются между 8,8 мл и 10,9 мл. Хлорорганические и пиретроидные инсектициды элюируются обычно между 8,5 мл и 10,3 мл.
2.2. Хлорорганические и пиретроидные инсектициды. В хроматографическую колонку длиной 0,10 м и с внутренним диаметром 5 мм помещают немного обезжиренной ваты и 0,5 г силикагеля, обработанного следующим образом: нагревают силикагель для хроматографии Р при температуре 150 °С как минимум 4 ч. Охлаждают и добавляют по каплям воду Р в количестве 1,5 % массы силикагеля, интенсивно перемешивая до полного разрушения агломератов, и продолжают перемешивать 2 ч с помощью механического аппарата для встряхивания. Обрабатывают колонку 1,5 мл гексана Р. Также могут быть использованы набитые колонки, содержащие около 0,50 г силикагеля, при условии, что возможность использования их обоснована.
Концентрируют раствор B в токе гелия для хроматографии Р или бескислородного азота Р практически досуха и растворяют в подходящем объёме толуола Р (от 200 мкл до 1 мл в зависимости от объёма, использованного при приготовлении раствора В). Количественно переносят раствор на колонку и хроматографируют, используя 1,8 мл толуола Р в качестве подвижной фазы. Элюат собирают (раствор С).
3. КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ
3.1. Фосфорорганические инсектициды. Исследование проводят с помощью газовой хроматографии (2.2.28) используя карбофенотион Р в качестве внутреннего стандарта. Возможно понадобится второй внутренний стандарт в случае идентификации возможных примесей со временем удерживания, которое соответствует карбофенотиону.
Испытуемый раствор. Концентрируют раствор В в токе гелия для хроматографии Р практически досуха и растворяют в 100 мкл толуола Р.
Раствор сравнения. Готовят, по крайней мере, три раствора определяемых инсектицидов и карбофенотиона в толуоле Р с концентрациями, подходящими для построения калибровочного графика.
При хроматографировании могут использоваться:
- капиллярная колонка длиной 30 м и с внутренним диаметром 0,32 мм, внутренняя стенка которой покрыта слоем в 0,25 мкм поли(диметил)силоксана Р;
- водород для хроматографии Р как газ-носитель; другие газы, такие как гелий для хроматографии Р или азот для хроматографии Р также могут быть использованы, при условии, что возможность использования их обоснована;
- фосфоро-азотный пламенно-ионизационный детектор или атомно-эмиссионный детектор,
поддерживают температуру колонки 80 °С в течение 1 мин, затем поднимают её со скоростью 30 °С до 150 °С, при температуре 150 °С колонку выдерживают 3 мин, после чего поднимают температуру со скоростью 4 °С до 280 °С и поддерживают эту температуру 1 мин; температуру инжектора поддерживают 250 °С, а температуру детектора 275 °С. Вносят необходимый объём каждого раствора. При условии соблюдения вышеуказанных условий проведения хроматографии относительное время удерживания веществ будет близким к значениям, указанным в таблице 2.8.13.-3. Подсчитывают содержание каждого инсектицида исходя из площадей пиков и концентраций растворов.
Таблица 2.8.13.-3
Относительные времена удерживания инсектицидов
Вещество Относительное время удерживания
Дихлофос 0,20
Фонофос 0,50
Диазинон 0,52
Паратион-метил 0,59
